Espectro de absorbância da clorofila: prática com alface e espectrofotômetro
Nesta atividade prática, preparamos um extrato etanólico de pigmentos fotossintéticos de folhas de alface e avaliamos sua absorbância em diferentes comprimentos de onda do espectro visível, entre 400 e 700 nm, utilizando um espectrofotômetro.
Objetivo da atividade
Observar experimentalmente como os pigmentos presentes nas folhas absorvem seletivamente diferentes regiões da luz visível e relacionar o espectro obtido com a coloração verde das folhas e com a função das clorofilas na fotossíntese.
Como o experimento foi realizado
As folhas de alface foram utilizadas para obtenção de um extrato de clorofila com etanol. Em seguida, a amostra foi analisada em espectrofotômetro de luz visível, registrando-se a absorbância em diferentes comprimentos de onda.
Espectro de absorbância obtido
O gráfico abaixo apresenta os dados experimentais da aula. Passe o cursor sobre os pontos para visualizar o comprimento de onda e a absorbância. A leitura de 560 nm não foi realizada na série experimental.
Leitura visual do espectro:
O que o gráfico mostra?
Os dados apresentam uma região de elevada absorbância no azul, com máximo experimental em aproximadamente 440 nm (A = 0,665), e uma segunda região de absorção no vermelho, próxima de 660 nm (A = 0,400).
Entre aproximadamente 500 e 560 nm, região associada principalmente à luz verde, a absorbância é baixa. Essa faixa é relativamente pouco absorvida pelas clorofilas e, por isso, uma parcela maior da radiação verde é refletida ou transmitida, contribuindo para a coloração verde observada nas folhas.
O extrato vegetal contém principalmente clorofilas a e b, cujos espectros se sobrepõem. O resultado observado em aula representa, portanto, o espectro combinado dos pigmentos presentes no extrato.
Dados experimentais
| Comprimento de onda (nm) | Absorbância |
|---|---|
| 400 | 0,528 |
| 420 | 0,624 |
| 440 | 0,665 |
| 460 | 0,441 |
| 480 | 0,334 |
| 500 | 0,080 |
| 520 | 0,052 |
| 540 | 0,055 |
| 580 | 0,087 |
| 600 | 0,102 |
| 620 | 0,129 |
| 640 | 0,146 |
| 660 | 0,400 |
| 680 | 0,126 |
| 700 | 0,024 |
Para discutir em sala
Compare as regiões de maior e menor absorbância e responda: por que a folha parece verde? Como o espectro obtido se relaciona com o aproveitamento da luz pela fotossíntese? O que mudaria no gráfico se a concentração do extrato fosse alterada?